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高效液相色谱仪配示差检测器测定蜂蜜糖类的方法

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高效液相色谱仪配示差检测器测定蜂蜜糖类的方法

     高效液相色谱仪配示差检测器测定蜂蜜糖类的方法是深圳市亿鑫仪器设备有限公司提供。详细方法如下:

一、原理:试样用水溶解,乙睛定容后,经0.45um滤膜过滤,高效液相色谱仪配示差折光检测器测定,外标法定量

二、 试剂和材料

1、乙腈:色谱纯。

2、水:GB/T 6682规定的一级水。

3、 果搪、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准物质:纯度≥99% .

4、果糖、葡萄糖标准储备溶液:准确称取5g果糖标准物质和4g葡萄糖标准物质,精确至0.0001g,放人同一100mL 容量瓶中,加人60mL水溶解,用乙腊定容至体积,摇匀。

5、 蔗糖、麦芽糖标准储备溶液:分别称取2g蔗糖和2g麦芽糖标准物质,精确至0.0001g,放入同一100mL 容量瓶中,加人60mL水溶解,用乙腊定容至体积,摇匀。

6、 果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准工作溶液:吸取不同体积的果糖、葡萄糖标准储备溶液和蔗糖、麦芽糖标准储备溶液,用乙睛十水( (40+ 60)稀释至体积,配成不同浓度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准工作溶液,用于绘制标准工作曲线。

三、仪器

高效液相色谱仪:配有示差折光检测器。

分析天平:感量0.1mg和0.001g各一台。

注射器:10ml。

有机相过滤膜:0.45um

样品瓶:1.5ml。

容量瓶:10ml , ,25ml ,50ml 100ml

四、 试样制备与保存

1、试样的制备:对无结晶的实验室样品,将其搅拌均匀。对有结晶的样品,在密闭情况下,置于不超过 60℃的水浴中温热,振荡,待样品全部融化后搅匀,冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中,密封,并做上标记。

2、 试样的保存:将试样于常温下保存。

五、 测定步骤

1、提取:称取5g试样,精确至0.001g。置于100ml烧杯中,加人30mL水,用玻璃棒搅拌使试样完全溶解,转移至100ml容量瓶中,然后再用10mL水洗烧杯三次并转移至上述100ml容量瓶中,用乙睛定容至体积,混匀。用0.45um滤膜将样液过滤人样品瓶中供高效液相色谱仪测定。

2、液相色谱条件:

a) 色谱柱:碳水化合物分析柱 10um ,  300mm X 3.9mm (i.  d);

b) 流动相:乙睛+ 水( (77+ 23);

c) 流速:1.0ml/min ;

d) 柱温 ;25℃;

e) 检测器池温度:35℃ ;

f) 进样量,15uL ,

3、液相色谱测定:用配制的果搪、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准工作溶液绘制以峰高为纵坐标,工作溶液浓度为横坐标的标准工作曲线,保证样品溶液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的响应值均应在标准工作曲线的线性范围内,样品溶液与标准工作溶液等体积进样进行高效液相色谱仪测定。在上述色谱条件下,果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的分离度应大于 1.5。



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